Ein Enzym, die katalysiert die Reaktion, die zwei DNA-Moleküle über die Bildung einer Phospho-Diester links zwischen den 3´ Hydroxyl und 5´ Phosphat angrenzende Nukleotide verbinden. Es spielt eine wichtige Rolle bei der DNA-Reparatur und Replikation. DNAligase ist eines der wesentlichen Instrumente der Recombinant DNA Technologie, ermöglicht (unter anderem) die Aufnahme Fremder DNA in Vektoren. Des Ligase-Enzyms codiert Phage T4 in gen-Klonen Experimente häufig verwendet wird. ATP als eine Co-factor erfordert. T4 ist verwendet in Vitro zu verbinden den Vektor und DNAs einfügen.