Mutagenèse lorsque la mutation est due à l'induction in vitro réalisée dans un site spécifique à une molécule d'ADN. La méthode la plus courante consiste à utiliser un mutant chimiquement synthétisés oligonucléotides qui peut s'hybrider avec la molécule d'ADN cible. Le duplex d'ADN porteurs de décalage qui en résulte peut ensuite être transfecté dans une lignée de cellules bactériennes et les brins de mutant récupérés.