Spesifik dan akurat sintesis RNA dalam menggunakan tabung dimurnikan DNA persiapan sebagai template. Apa yang disebut "ditambah sistem" dapat diperoleh dari E. coli yang melaksanakan mRNA sintesis dan terjemahannya ke protein. Untuk eukariota, sistem bebas sel terpisah harus diatur untuk menunjukkan aktivitas kompleks fungsional berbeda RNA polimerase tiga.