Dvojitý-plietol DNA molekuly alebo DNA-RNA hybrid, kde každý prameň je iného pôvodu, a následne obsahujúce jeden alebo viac nezhodné (non-doplnkové) bázových párov. A DNA Dvojúrovňový sa pripravuje hybridizácia single-plietol DNA molekúl odvodené z dvoch rôznych zdrojov. Kde dve PNO majú rovnaké alebo veľmi podobné sekvencií, dvojitý-plietol molekula sa zriadi, keďže kde dve PNO rozdiely v sekvencii, single-plietol regiónov zostane. Heteroduplex bude odhalené ako single-strand "křoví" keď DNA je pozorovaný elektrónovým mikroskopom. Tým môže byť postavená mape homologických a nehomologických regiónov z dvoch molekúl. Tento proces je známy ako heteroduplex mapovanie.