1.合成的雙鏈寡核苷酸，有鈍的結束，而另一端有一個核苷酸擴展，可以創建的特定類型 II 限制性內切酶與 DNA 分子裂解的粘性末端的堿基對。可以向一個目標 DNA 分子的兩端結紮配接器 鈍一端和構造可以克隆成一個向量，通過使用配接器的粘性末端。

2。 A 合成的單鏈寡後植株，產生分子與粘性末端和內部限制性內切酶網站。將配接器插入到克隆載體通過粘性末端時, 的內部序列提供了新的限制性內切酶網站。